什么叫PCR實驗室:
PCR實驗又稱為臨床基因擴增實驗,是專門用來檢測艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進行擴增的方法,測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點。因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。但是,這種實驗需要有能保證絕對安全、配置合理的實驗室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來對臨床基因擴增檢驗室實驗室的建設(shè)越來越得到重視。因些它對檢測結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。
PCR實驗室的基本設(shè)計:
PCR實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染,。因為一旦發(fā)生污染,實驗就必須停止,直到找到污染源為止,而且實驗結(jié)果必須作廢,需重新進行實驗。所以發(fā)生污染后在圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免污染,首先是預(yù)防,而不是排除。
PCR實驗室分為四個區(qū)域,進入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進行
1.試劑配制區(qū);(擴增試劑的配制、分裝和保存)
2.樣品處理區(qū);(樣品登記、分裝。核酸提取、保存和加鮮)
3.核酸擴增區(qū);(擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告)
4.產(chǎn)物分析區(qū);
注:如使用全自動分析儀,區(qū)域可適當(dāng)合并,3、4區(qū)可合并成擴增產(chǎn)物分析區(qū)。
PCR實驗室施工基本要求:
室的墻體包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧型線條過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
1、主體結(jié)構(gòu):
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡明、美觀大方、密封性好。
2、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié):
將PCR過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴增 、產(chǎn)物分析四個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個PCR實驗過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
3、消毒:在實驗區(qū)和緩沖區(qū)頂部及傳遞窗內(nèi)部安裝紫外線燈。供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū),還設(shè)備移動紫外線燈,對實驗桌進行局部消毒。
4、不銹鋼傳遞窗:
試劑和標(biāo)本通過機械連鎖不銹鋼傳遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本和傳遞過程中不受污染(人物分流)。
5、地面:地面建議使用PVC卷材或自流坪地面,整體性好。便于進行清掃,耐腐蝕。
6、照明:燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點
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